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    百靈威科技有限公司是一家致力于研發和生產超精細化學品,集敏捷制造、全球營銷和現代物流為一體的高科技企業。百靈威在中國內地、香港、歐洲及北美等全球多個國家和地區,設有物流中心,實行專業化、個性化的一站式服務,為全球超過120,000名科技和工業領域的客戶提供了大規模配套技術服務及產品資源。

    毛地黃皂苷是從紫花毛地黃的葉和種子中得到的一種配糖體。水解后,它能和具有游離3β-OH 的甾體類(例如膽甾醇)以等分子的比例形成難溶于水的分子化合物的毛地黃皂苷化合物,因此被廣泛利用來進行甾醇的定性和分離。同時,在生化研究領域,毛地黃皂苷也可作為免疫沉淀最常用的去污劑、溶解線粒體外膜試劑等。

    百靈威推薦J&K毛地黃皂苷:
    嚴格質量管理體系,品質卓越,克級至公斤級穩定提供。
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    ◆產品介紹

    產品編號
    中文名稱
    英文名稱
    CAS
    包裝
    毛地黃皂苷
    Digitin
    500 mg
    5 g   
    分子式:C56H92O29
    分子量:1229.32
       度:>50% (HPLC)
       點:235-240℃
    比旋光度[α]20D-54°(0.45g于15.8 mL甲醇中)
       狀:白色結晶粉末,有吸濕性
    溶解性:1g溶于57mL無水乙醇、溶于220 mL 95%乙醇,幾乎不溶于水、乙醚和氯仿
    儲存條件:充氬密封干燥保存

    ◆ 技術說明

    1.甾醇沉淀反應

    ①羊毛醇中膽甾醇含量測定:精確稱量約1 g 干燥羊毛醇,加溫乙醇25 mL 溶解,過濾,殘留物用50 mL 溫乙醇洗滌,冷后,濾液中加乙醇至100 mL,取此液 10mL,加毛地黃皂苷/ 乙醇溶液(1/200)40 mL,將此液加溫至60℃后,室溫放置18 h,用已知質量的坩堝形玻璃過濾器將析出物濾出,殘留物依次用乙醇15 mL、丙酮15 mL、熱四氯化碳15 mL洗,并在105℃干燥至恒重,按下式計算膽固醇量:膽甾醇的量(mg)= 析出物的量(g)×241。

    ②維生素D 測定步驟中,將樣品通過毛地黃皂苷柱子,利用甾醇與毛地黃皂苷生成沉淀而除去甾醇,洗脫液為乙醚/ 己烷 = 1/5 配制而成,甾醇/毛地黃皂苷 = 1/14 用量。

    ③支原體毛地黃皂苷敏感性試驗方法:用95% 酒精配制1.5% 毛地黃皂苷液,56℃水浴加熱使溶解,將此液浸濕滅菌的小圓濾紙,37℃使干燥,置冰箱保存使用。將待檢支原體菌液涂種于固體培養基上,將上述毛地黃皂苷紙片放于接種培養基上,培養3-5d 后,低倍鏡下觀察菌落生長情況,若有抑制帶出現,帶寬 >2 mm 的為支原體,帶寬 <2 mm 為無甾醇原體。

    2.溶膜除垢

    有些巨噬細胞、肥大細胞、淋巴細胞等在常用的電泳緩沖液中難以溶膜,毛地黃皂苷可與細胞膜上的膽固醇作用,使細胞膜穿孔、溶解,穿孔后蛋白質等大分子的活性部分伸到細胞外, 與熒光標記的相應抗體結合, 通過毛細管電泳, 單個細胞表面的熒光強度可被激光檢測, 從而可反映單個細胞內某蛋白分子的含量。

    細胞凋亡的檢測中,凋亡檢測采用APO 2.7 標記法,取1×106 個細胞,加入毛地黃皂苷100 μL,冰浴20 min,用冷PBS 洗一遍,加20 μL APO 2.7PE,震蕩、混勻,室溫避光15 min,用PBS洗一遍,棄上清,重懸,避光至上機檢測(Ref.(1) )。

    取處理后的2 種腫瘤細胞每毫升106個,PBS 洗2 次,移入已硅化的玻璃管。于室溫下加100 g/mL-1 毛地黃苷(digitonin)100 μL后加藻紅素(R-phycoerythrin) 標記的APO 2.7 單抗(APO2.7PE-CY5),于流式細胞儀(EPISC XL,Coulter) 上進行熒光檢測,并給出相應的凋亡細胞百分率(Ref.(2))。

    Ref.:
    Ref.(1) 賈京錦等. 疑難病雜質.2006.5(4).
    Ref.(2) 中國農業科學 2004,37(9):1379-1384.

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